圓二色譜實驗報告
隨著人們自身素質(zhì)提升，報告的用途越來越大，不同種類的報告具有不同的用途。一聽到寫報告就拖延癥懶癌齊復發(fā)？下面是小編幫大家整理的圓二色譜實驗報告，歡迎閱讀，希望大家能夠喜歡。
一、實驗目的
1、了解圓二色（cD）光譜的工作原理。
2、學會運用圓二色譜測氨基酸，蛋白質(zhì)，DnA。
二、實驗原理
對R和L兩種圓偏振光吸收程度不同的現(xiàn)象。這種吸收程度的不同與波長的關系稱圓二色譜，是一種測定分子不對稱結(jié)構(gòu)的光譜法。圓二色光譜是一種差光譜，樣品在左旋偏振光照射下的吸收光譜與其在右旋吸收光譜照射下的偏振光之差。物質(zhì)的吸收光譜決定物質(zhì)的顏色。如果一個物質(zhì)對左旋偏振光和對右旋偏振光的吸收不同，那么稱該物質(zhì)具有圓二色性(circulardi2chroism，簡稱cD)。同樣，如果一個物質(zhì)對于不同方向的線偏振光的`吸收不同，那么該物質(zhì)具有線二色性。很多各向異性的晶體具有線二色性;而很多生物大分子和有機分子具有圓二色性在分子生物學領域中主要用于測定蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)，也可用來測定核酸和多糖的立體結(jié)構(gòu)。圓二色譜儀由光源、單色器、起偏器、圓偏振發(fā)生器、試樣室和光電倍增管組成。
三、實驗步驟
1.通高純氮氣45min后，開機
2.點亮氙燈:打開主機電源InSTRUMEnTPoWER;打開氙燈電源XEnonLMAPPoWER;等待LMAPready燈亮；按紅色IGnITELMAP按鈕
3.打開主板電源InSTRUMEnTPoWER
4.打開Thermocubechiller(開關在冷卻器左邊）
5.打開軟件，設置參數(shù)，選擇數(shù)據(jù)保存設置；選擇保存位置；開始實驗，保存數(shù)據(jù)
6關軟件TerminatecDSProgram中關閉
7關氙燈電源XEnonLMAPPoWER
8關閉Thermocubechiller
9等待10min后關閉高純氮氣（可先行下述步驟）
10清洗比色皿、注射泵及其他附件
11光盤刻錄數(shù)據(jù)
在蛋白質(zhì)分子中，肽鏈的不同部分可分別形成α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角等特定的立體結(jié)構(gòu)。這些立體結(jié)構(gòu)都是不對稱的。蛋白質(zhì)的肽鍵在紫外185～240納米處有光吸收，因此它在這一波長范圍內(nèi)有圓二色性。幾種不同的蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)所表現(xiàn)的橢圓值波長的變化曲線──圓二色譜是不同的。α-螺旋的譜是雙負峰形的，β-折疊是單負峰形的，無規(guī)卷曲在波長很短的地方出單峰。蛋白質(zhì)的圓二色譜是它們所含各種立體結(jié)構(gòu)組分的圓二色譜的代數(shù)加和曲線。因此用這一波長范圍的圓二色譜可研究蛋白質(zhì)中各種立體結(jié)構(gòu)的含量。
在上面兩幅圖中，圖b是圖a稀釋的到的，在上圖中，可看出在270～240nm之間有明顯的雙負峰，可推斷此物質(zhì)為蛋白質(zhì)，且為α-螺旋結(jié)構(gòu)。
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